马铃薯茎尖脱毒及组培快繁技术
发布时间:2024-11-24 06:44:50 来源:农资网 编辑:郑钦文 本文有1187个字,大约阅读时间3分钟1 材料和方法
1.1 供试材料
采用当家品种下寨65和青薯168.
1.2 试验方法
1.2.1 催芽 于11月中旬左右,挑拣表皮光滑、正常薯形、大小均匀、无病害和无损伤薯块,放置在有供暖的房间,室内温度24 ℃左右进行催芽。在催芽前薯块正处于休眠期,采用0.05~0.l0 mg/L的GA3来处理薯块,浸没于GA3溶液中10~20 min,以打破休眠[4].
1.2.2 种薯处理 采用MS培养基,加入不同配比的激素,准备BA、NAA、GA3、IBA和IAA,由于激素在培养基中用量非常少,且不易溶于水,所以采用特殊的配置方法,配置成500 mg/L的溶液待用。当两个品种的种薯芽长到2~3 cm时,挑选生长健壮的芽,用清水冲洗芽部表面污物,在无菌操作室采用12种不同的方法进行表面消毒,用最近制作的蒸馏水冲洗四五次,将表面消毒剂彻底清除,不同表面消毒剂处理时间见表1.
1.2.3 茎尖组织培养 在解剖镜下剥取大小为0.30~
0.50 mm茎尖生长点,置于不同浓度生长调节剂的MS培养基上进行培养,培养基编号为MS1~MS12,另设不加任何生长调节剂的MS培养基作为对照(CK),植物生长调节剂配比见表2.
1.2.4 马铃薯脱毒苗培养 在无菌条件下,将得到的无毒苗进行切段,每段带一叶,置于不同种类、浓度的1/2MS培养基中进行培养,中国农业网以不加任何生长调节剂的1/2MS培养基作为对照,编号为M1~M9,快繁培养基配比见表3.
2 结果与分析
2.1 不同表面消毒方法对茎尖成活率和污染的影响
从表4可以看出,在茎尖组织培养过程中,外植体在清水冲洗后,直接采用0.1 %***或5 %次氯酸钠消毒,都可以将污染控制在5 %以下,但需时稍长,不同程度地影响到成活率。另外由于***的渗透性强,不宜彻底清洗,且对环境污染严重,建议尽量不要使用。
2.2 不同生长调节剂培养基配比对茎尖组织生长的影响
从表5可以看出,不含生物调节剂的培养基,马铃薯茎尖组织的生长非常缓慢,导致成苗率低下。在同等条件下,KT和6-BA对马铃薯茎尖组织的生长都具有促进作用,且效果显著,就这两种物质而言,含有KT的培养基中成苗率较低。在同等条件下加入GA3,可明显促进马铃薯茎尖组织分化,加快生长,提高成苗率。
2.3 不同生长调节剂配比对马铃薯脱毒苗快繁的影响
经过观测表明,与对照培养基相比较,培养基中加入生长调节剂后,芽萌发推迟,有效促进幼根生长。生长调节剂浓度过大时,愈伤组织发达,生根受到抑制。在实验中观察到下寨65对NAA较为敏感,浓度稍大就会产生较大愈伤组织,生根较为缓慢,而青薯168反应较为迟钝,结果见表6.
3 结论
通过实验发现,在马铃薯脱毒技术实施过程中,采用酒精与其他两种表面消毒剂配合使用效果最好,能有效控制污染,降低对茎尖组织的影响。剥离的茎尖组织诱导成苗是脱毒快繁的关键技术,在实验中,KT和BA均有助于茎尖组织分化成苗。在快繁中,适当浓度的生物调节剂对马铃薯茎段生根有促进作用,但当浓度过高时只产生分生组织,不利于小苗生根,而且各品种表现有所不同。
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